非瘟防控关键举措,拔牙式清除依赖——早期检测与唾液采集五步曲策略

非瘟,即非洲猪瘟(African Swine Fever,ASF),是一种高度传染性的病毒性疾病,对养猪业具有极大的破坏力。为了有效控制非洲猪瘟,实施“拔牙”式清除策略至关重要。以下是在早期检测非洲猪瘟病毒过程中,通过唾液采集进行病毒检测的五个步骤:
1. "选择合适的检测工具": - 根据实验室条件和检测需求,选择合适的非洲猪瘟病毒检测工具,如实时荧光定量PCR、ELISA等。
2. "采集样本": - 选择健康的猪群进行唾液采集,避免采集病猪或疑似病猪的样本。 - 使用无菌棉签或拭子,轻轻擦拭猪口腔内壁,确保采集到足够的唾液。
3. "样本保存": - 采集到的唾液样本需要立即放入无菌容器中,并加入适量的保存液,以防止病毒失活。 - 将样本放入冷藏袋,并标明采集日期、猪只编号等信息。
4. "样本处理": - 将采集到的唾液样本进行离心处理,以分离病毒核酸。 - 将处理后的上清液作为检测样本,进行后续的病毒检测。
5. "病毒检测": - 将处理后的样本进行非洲猪瘟病毒检测,如实时荧光定量PCR、ELISA等。 - 根据检测结果,判断猪只是否感染非洲猪

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猪场在发生非洲猪瘟以后会采取“拔牙”式清除让猪群尽快稳定下来,拔牙是将阳性个体或群体从可能还未感染猪群中安全清除的方式,其关键是要做到早期诊断,否则一旦猪场呈现“多点式”发病,想要取得拔牙成功会增加难度,也会让猪场遭受巨大的经济损失。


实验结果显示,非洲猪瘟在自然感染情况下病毒最早出现在唾液中,较血液中出现病毒载量早3-4天,因此唾液检测已然成为精准拔牙的重要手段。那么如何做好唾液的采集与储存,供以养猪从业者参考。


1. 唾液样品采集的方法

第一步,取出样品采集袋,并放入样品采集袋置于栏内猪只容易接触到的地方,样品采集袋与采样猪只肩部同高,不可放在容易被污染的如猪只饮水或拉粪尿的区域,防止样品在采集过程中被直接污染。

第二步,待样品采集袋被猪只的唾液充分浸润后,然后将唾液挤出到样品收集袋内,对取样后的样品采集袋进行归集,做焚烧等的无害化处理,防止其在场区内成为新的疫病传染源。


第三步,将唾液挤出转移到样品收集管内,需要注意的是每个样品至少2ml,取样量太少不利于实验室检测的实施。


第四步,在唾液收集的过程中如果遇到杂质,如饲料、食物残渣等,必要的时候需要做好离心,2000g的离心力,进行10分钟的时间。


第五步,样品收集管要要特别注明取样猪场名称,取样栋舍以及取样日期,对之后采取精准拔牙有着至关重要的作用(唾液样品可以混合,但不宜超过5个样品,过多会影响检测的准确度)。

2. 唾液样品的保存

对采集的唾液样品在送往实验室前需要保存在冰箱内,必须在24小时内送往实验室进行检测。如果不能或是要用作后期的复检,则应将样品保存于-20至-80℃冷冻保存,并且加入核酸保护液。


3. 唾液样品采集的几点注意事项

1)对计划采集唾液样本的猪群在前晚停料不停水,间隔10-12小时采集唾液,保证唾液里面没有食物残渣,确保检测结果不受影响。

2)对母猪或公猪可以单头采集唾液,保育仔猪或育肥猪可以采集群体唾液。

3)采集完唾液,将唾液与核酸保护液按1:1,马上挤到含核酸保护液的瓶中(唾液中的酶对病毒有降解作用),之后采用冰袋运至实验室。

4)如果直接送至实验室可以2~8℃保存,用于长期之后的复检,需要-20至-80℃保存。


小结

“拔牙”式清除是非瘟防控与快速稳定猪群卓有成效的手段,想要做到精准拔牙有赖于唾液检测的早期诊断,唾液样品的采集与储存要精心设计,以确保检测的准确性。在样品采集时要注意样品被污染的风险,对参与样品采集的样品采集袋、样品收集袋等做好无害化处理以减少可能成为场区内新的传染源。同时对拔牙后幸存的猪只采取必要的措施干预,以防止再次的发病,在饲料中持续添加中药制剂康之源4kg/t维持猪群的持续稳定,并加快猪群的快速转阴。

发布于 2025-06-05 19:12
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